Comment effectuer une HPLC
Contenu
La machine d`HPLC est constitué d`un réservoir, un dégazeur, un injecteur, une colonne fixée au four et le détecteur, un intégrateur et un logiciel (voir la Ressource 1).
Les choses dont vous aurez besoin
- Logiciel
- Ordinateur
- HPLC
- seau déchets
- Réactif (méthanol / eau)
- pH (papier de tournesol)
- Électricité
HPLC en cours d`exécution
Allumez la machine HPLC suivant les directives du fabricant. Mettre en place l`instrumentation (voir référence 1). Réglage de la HPLC est correctement l`aspect principal de ce test et il existe une technique standard. Choisir la méthode appropriée pour les substances à analyser par HPLC.
Placez la colonne de droite de la manière correcte suite à la mise en place de flèche indiquant. Régler la longueur d`onde pour être en mesure de détecter les composés complexes. Mettre en place la bonne température.
Vidéo: Chromatographie sur couche mince - ECE - Physique-Chimie - Terminale - Les Bons Profs
Laver la colonne avec 50% de methanol et de l`eau pendant 30 minutes. Laisser la phase mobile de passer à travers.
Mettre en place le débit comme indiqué dans la méthodologie.
Vidéo: Analyse en HPLC/MS et en CPG
La phase mobile HPLC est critique et dépend des résultats satisfaisants si la préparation a été effectuée correctement (voir référence 2). Il existe deux types de phase mobile utilisée en HPLC, gradient d`élution isocratique ou. gradient d`élution est où deux phases mobiles organiques sont nécessaires, à des moments différents. Avec élution isocratique, une seule phase organique est nécessaire (méthanol / eau).
Assurez-vous que la machine de HPLC et l`ordinateur sont reliés par l`intermédiaire d`un câble RS232 pour permettre à l`information de circuler entre les deux machines (voir référence 3).
Préparer l`échantillon en fonction de la spécification dans la méthodologie. Choisissez la méthode d`analyse désirée et enregistrée sur l`ordinateur.
Choisissez la HPLC à droite quand il y a beaucoup de machines HPLC liées. Aller à l`instrument et ouvrir la liste d`échantillons.
Ouvrez une fenêtre et d`écrire le nom et la date du test. Sauvegarde le.
Vidéo: La Chromatographie sur Colonne
La liste des échantillons apparaîtra sous forme de tableau. Remplissez les détails sur le graphique pour l`échantillon que vous avez préparé.
Placez les flacons échantillons correctement dans la machine selon la méthodologie. Appuyez sur start pour commencer l`analyse.
Conseils Avertissements
- Toutes les étapes de HPLC et la préparation des échantillons doit être correcte afin d`éviter un test de répétition. enquêtes répétées coûtent du temps et de l`argent.