Sources d`erreur dans Gel Electrophoresis

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L`électrophorèse sur gel implique l`utilisation d`un gel habituellement fabriqués à partir de polymères tels que l`agarose. Le gel est plongé dans une solution tampon qui conduit un champ électrique. L`échantillon d`ADN d`intérêt est d`abord fragmentés en utilisant des enzymes de restriction et est ensuite injecté dans le gel. Lorsque le champ électrique est sous tension, les fragments d`ADN dans le gel migrent vers l`électrode positive. Si les fragments d`ADN sont de tailles différentes, alors les temps de migration seront différentes pour chaque fragment de taille. Les fragments sont ensuite visualisés en utilisant un colorant ou autoradiographie et sont visibles sous forme de bandes dans le gel.

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La principale application de l`électrophorèse est un outil pour l`analyse de l`ADN en biologie moléculaire, mais il est également utilisé en médecine légale comme un moyen d`identification des échantillons à partir d`une scène de crime. Il est important que les sources d`erreurs dans cette technique sont réduits au minimum afin d`obtenir des résultats précis. Une source d`erreur est la contamination de l`échantillon d`ADN. S`il y a un ADN étranger dans l`échantillon, le gel aura plus de groupes que l`on trouverait dans un gel qui ne contient que l`échantillon purifié.

La concentration du gel doit également être correct pour éviter les erreurs. Si la concentration est trop élevée ou trop faible, les fragments migrent trop lentement ou trop vite. Cela conduira à des erreurs dans la résolution des différentes bandes. Pendant la course d`électrophorèse, il faut veiller à ce que la tension est constante. Les éventuelles fluctuations de la tension entraînera la migration chancelante des fragments d`ADN, conduisant à des erreurs dans la lecture des bandes. La solution tampon doit également être de la composition correcte, comme un tampon avec le mauvais pH ou de la concentration ionique va changer la forme des fragments d`ADN, en changeant également leur temps de migration.

Plus important encore, le gel doit être visualisé correctement. Si la concentration du colorant ou de la sonde radioactive utilisée pour visualiser les échantillons est trop élevée, l`image résultante sera très salissant, sous forme de fragments résiduels seront également visualisées. Si la concentration de gel est trop faible, il n`y aura pas de visualisation. Lorsque les processus ont été suivies pendant toutes les étapes, l`électrophorèse sur gel donnera des résultats précis et peuvent être utilisés avec une grande confiance. Comme avec toutes les procédures scientifiques, l`électrophorèse sur gel peut être sujette à des erreurs, mais celles-ci peuvent être réduits au minimum avec une bonne préparation et la manipulation.